細胞から抽出したDNAサンプルは、濃縮や不要物の除去を行って精製する必要があります。この記事では、ライフサイエンス実験の基礎であるDNAのクリーンアップ方法について、エタノール沈殿・RNase処理・フェノールクロロホルム抽出をとりあげ、説明します。 クロロホルム/メタノール =1/2 溶液 300 µl クロロホルム 100 µl h2o 100 µl 有機層(脂質) 水層(dna, 糖,イオン) 中間層 (蛋白質) クロロホルム/メタノール/h2o = 1/1/1になる 脂質の混合物なので 特定の脂質を検出す るためには分離する 必要がある。 次のステップは, 分離/精製. クロロホルムは毒性の面から控えられてますが、昔はたくさん使ってます。tlcで見るときは100:1とかでも使用しますが、カラムに応用するとあまりうまく行かない気がします。メタノールの成分割合が小さすぎるからでしょうか?私のカラムの腕が悪いだけかも?
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